J.P. Euzéby : Dictionnaire de Bactériologie Vétérinaire |
Dernière mise à jour le 16 septembre 1999
BARTONELLA ALSATICA
Voir aussi le fichier ¤ Bartonella.
Systématique
La découverte de ¤ Bartonella henselae et de son rôle en tant qu'agent étiologique de la ¤ maladie des griffes du chat a suscité la recherche de bartonelles chez les espèces animales vivant dans l'environnement de l'homme. Ainsi, ont été décrites ¤ Bartonella doshiae (1995), ¤ Bartonella grahamii (1995), ¤ Bartonella taylorii (1995), ¤ Bartonella clarridgeiae (1996), ¤ Bartonella vinsonii subsp. berkhoffii (1996), ¤ Bartonella tribocorum (1998) et, en 1999, Bartonella alsatica.
Bartonella alsatica est la treizième espèce décrite au sein du genre Bartonella (voir : ¤). Cette nomenclature a été proposée pour neuf souches de Bartonella sp. isolées du sang de lapins sauvages (Oryctolagus cuniculus) capturés en Alsace.
La séquence complète du gène codant pour l'ARNr 16S a été déterminée pour 3 souches (IBS 382, IBS 379 et IBS 460). Ces 3 séquences sont identiques entre elles et elles présentent un pourcentage d'homologie supérieur ou égal à 97,8 p. cent avec les séquences des souches types de 9 autres espèces du genre Bartonella* (l'homologie la plus forte, 99,3 p. cent, est observée avec ¤ Bartonella vinsonii subsp. vinsonii).
Pour les 6 autres souches, seul le séquençage des 430 premières bases a été réalisé et les résultats montrent une identité complète avec la séquence homologue des souches IBS 382, IBS 379 et IBS 460.
Les études d'hybridation ADN - ADN montrent que les souches IBS 382, IBS 379 et IBS 460 constituent une unique genomospecies (pourcentage d'hybridation au moins égal à 81) et que cette genomospecies diffère des autres espèces phylogénétiquement proches (Bartonella doshiae, Bartonella elizabethae, Bartonella grahamii, Bartonella henselae, Bartonella taylorii et Bartonella vinsonii).
Pour une définition d'une genomospecies voir le fichier Définitions d'une genomospecies et d'une espèce bactérienne.
Caractères bactériologiques
Bartonella alsatica est un bacille à Gram négatif, non acido-alcoolo-résistant, de 0,5 à 0,8 mm de diamètre sur 1 à 2 mm de longueur, dépourvu de flagelle, aérobie, oxydase et catalase négatives. L'examen au microscope électronique révèle la présence de pili polaires.
Les caractères biochimiques ont été étudiés avec 3 souches en utilisant des tablettes Rosco Diagnostica (VP, pyrazinamidase et activité peptidasique vis-à-vis de la benzoyl-arginine-bêta-naphtylamide [activité trypsine-like]) et des kits MicroScan® Rapid Anaerobe Panel** (Baxter Diagnostics).
. Une réponse positive est notée pour les tests leucine-arylamidase, méthionine-arylamidase, lysine-arylamidase, glycine-arylamidase, proline-arylamidase, arginine-arylamidase, tryptophane-arylamidase, glycylglycylarylamidase et activité trypsine-like.
. Un résultat négatif est obtenu pour les tests VP, pyrazinamidase, uréase, acidification du tréhalose, pyrrolidonyl-arylamidase, hydrolyse du bis-p-nitrophényl phosphate et du p-nitrophényl N-acétyl-bêta-D-glucosaminide.
. Parmi les tests effectués, seule l'activité peptidasique vis-à-vis de la proline-bêta-naphtylamide permet de distinguer Bartonella alsatica (réponse positive) de ¤ Bartonella tribocorum (réponse négative).
Comme pour les autres bartonelles, la culture de Bartonella alsatica est longue et difficile. A l'isolement, 6 souches ont cultivé en 10 jours sur un milieu gélosé (gélose Columbia enrichie de 5 p. cent de sang de lapin défibriné) et en 4 semaines dans un milieu liquide (Bactec Peds Plus, Becton Dickinson). Les 3 autres souches n'ont pu être isolées qu'en milieu liquide après 4 semaines d'incubation.
Après 10 jour de culture sur une gélose Columbia enrichie de 5 p. cent de sang de lapin défibriné, incubée à 35 °C en atmosphère humide et en présence de 5 p. cent de CO2, les colonies sont lisses, blanches, à contour régulier et leur diamètre est d'environ 1 mm. En prolongeant l'incubation, les colonies grossissent, elles prennent une coloration brunâtre et deviennent adhérentes à la gélose.
Habitat et pouvoir pathogène
Les souches de Bartonella alsatica, première espèce du genre Bartonella isolée chez Oryctolagus cuniculus, ont été isolées à partir de 9 lapins sauvages capturés en Alsace. Les lapins semblaient en bonne santé et un examen anatomo-pathologique, pratiqué sur deux d'entre eux, n'a pas permis de mettre en évidence des lésions particulières. La souche type de Bartonella alsatica a été inoculée à 3 lapins de laboratoire. L'infection expérimentale s'est traduite par une bactériémie (sans symptôme) persistant 2 à 3 mois et par la présence de 10 à 40 bartonelles dans un érythrocyte sur 10 000.
Six espèces du genre Bartonella (Bartonella bacilliformis, Bartonella clarridgeiae, Bartonella elizabethae, Bartonella henselae, Bartonella quintana et Bartonella vinsonii) peuvent être pathogènes pour l’homme et au moins deux espèces (Bartonella henselae et Bartonella clarridgeiae) sont des agents de zoonose. La contamination de l'homme par Bartonella alsatica n'est pas documentée mais il n'est pas exclu qu'elle puisse exister (contamination par l'intermédiaire d'arthropodes présents chez les lapins, contamination lors de la manipulation de lapins tués à la chasse...).
Orientation bibliographique
HELLER (R.), KUBINA (M.), MARIET (P.), RIEGEL (P.), DELACOUR (G.), DEHIO (C.), LAMARQUE (F.), KASTEN (R.), BOULOUIS (H.J.), MONTEIL (H.), CHOMEL (B.) et PIÉMONT (Y.) : Bartonella alsatica sp. nov., a new Bartonella species isolated from the blood of wild rabbits. Int. J. Syst. Bacteriol., 1999, 49, 283-288.
HELLER (R.), RIEGEL (P.), HANSMANN (Y.), DELACOUR (G.), BERMOND (D.), DEHIO (C.), LAMARQUE (F.), MONTEIL (H.), CHOMEL (B.) et PIÉMONT (Y.) : Bartonella tribocorum sp. nov., a new Bartonella species isolated from the blood of wild rats. Int. J. Syst. Bacteriol., 1998, 48, 1333-1339.
Voir aussi le fichier ¤ Bartonella.
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* : Bartonella bacilliformis, Bartonella clarridgeiae, Bartonella doshiae, Bartonella elizabethae, Bartonella grahamii, Bartonella henselae, Bartonella quintana, Bartonella taylorii, Bartonella vinsonii.
Bartonella tribocorum, espèce décrite en 1998, n'a pas été incluse dans cette étude.
N.B. : Il n'existe pas de souches disponibles pour Bartonella peromysci et Bartonella talpae.
** Galerie MicroScan® Rapid Anaerobe Panel
(d'après la documentation technique MicroScan®, Dade International Inc., West Sacramento, CA 95691, U.S.A.)
L'auteur remercie le Vétérinaire Biologiste M. Boni (Secteur Vétérinaire de Marseille) qui lui a transmis la documentation technique MicroScan Rapid Anaerobe Panel.
La galerie MicroScan® Rapid Anaerobe Panel a été conçue pour l'identification des bactéries anaérobies mais elle est fréquemment utilisée pour les espèces du genre Bartonella.
La galerie comprend 24 substrats déshydratés et elle est inoculée (50 µL par puits) avec une suspension bactérienne dont l'opacité est comprise entre les valeurs 3 et 5 de l'échelle de McFarland. Les tests détectent des enzymes préformées et la croissance du germe n'est pas nécessaire si bien que la galerie est incubée sous une atmosphère normale durant 4 heures à 35 - 37 °C. Après incubation, la lecture repose sur les changements de pH et l'apparition de colorations après adjonction éventuelle de réactifs. Deux cupules de contrôle sont prévues pour faciliter la lecture. Un contrôle au nitrophényl qui doit rester incolore et un contrôle au bêta-naphthylamide qui doit virer au jaune-orange après addition du réactif "peptidase".
La liste des 24 substrats ainsi que le principe de la lecture sont donnés dans le tableau ci-dessous :
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Substrat |
Réactifs |
Réaction positive |
Réaction négative |
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p-nitrophényl-bêta-D-galactopyranoside* p-nitrophényl-alpha-D-galactopyranoside* Bis-p-nitrophényl-phosphate* p-nitrophényl-N-acétyl-bêta-D-glucosaminide* p-nitrophényl-alpha-D-glucopyranoside* o-nitrophényl-bêta-D-glucopyranoside* p-nitrophényl-phosphate* p-nitrophényl-alpha-L-fucopyranoside* p-nitrophényl-alpha-D-mannopyranoside* |
Aucun. Les résultats doivent être comparés avec celui d'une cupule témoin qui doit être incolore |
Toute coloration jaune |
Incolore |
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L-leucine-bêta-naphthylamide** DL-méthionine-bêta-naphthylamide** L-lysine-bêta-naphthylamide (alcaline)** L-lysine-bêta-naphthylamide (acide)** Glycylglycine-bêta-naphthylamide** Glycine-bêta-naphthylamide** L-proline-bêta-naphthylamide** L-arginine-bêta-naphthylamide** L-pyrrolidonyl-bêta-naphthylamide** L-tryptophane-bêta-naphthylamide** |
Ajouter une goutte du réactif "peptidase". Attendre au moins 30 secondes et au maximum 3 minutes. Les résultats doivent être comparés à celui d'une cupule témoin qui se colore en jaune après addition du réactif. |
Toute coloration rose à magenta |
Jaune ou orange |
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3-indoxyl-phosphate |
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Coloration bleue et précipité bleu |
Incolore |
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Tréhalose |
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Jaune |
Orange/rouge |
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Urée (recouvrir avec une à deux gouttes d'huile de paraffine) |
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Rose-rouge |
Jaune-orange |
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Indole (recouvrir avec une à deux gouttes d'huile de paraffine) |
Ajouter une goutte de xylène et remuer. Ajouter une goutte de réactif d'Ehrlich. Lire après 2 à 3 minutes. |
Rouge |
Jaune clair |
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Nitrate |
Ajouter une goutte d'acide sulfanilique et une goutte de N,N-diméthyl-alpha-naphthylamine. Lire après 2 à 3 minutes. |
Rouge |
Incolore ou rose pâle |
* : Les substrats d'ortho- ou de para-nitrophényl sont incolores. L'enzyme, lorsqu'elle est présente, hydrolyse le substrat et libère de l'ortho- ou du para-nitrophénol de couleur jaune.
** : Lorsque le substrat est hydrolysé par l'arylamidase appropriée, le bêta-naphthylamide est libéré et détecté par l'addition du réactif "peptidase" qui crée un complexe chimique de coloration rose à pourpre magenta.
La recherche de la catalase peut s'effectuer dans la cupule p-nitrophényl-bêta-D-galactopyranoside. En cas de réaction positive, l'adjonction de deux à trois gouttes d'eau oxygénée à 3 p. cent provoque l'apparition de bulles après 2 à 3 minutes.
Les tests sont séparés par groupe de trois et une valeur 4, 2 ou 1 est attribuée à chaque test. La valeur 4 est attribuée à une réponse positive notée pour le premier test d'un groupe de trois. La valeur 2 est attribuée à une réponse positive notée pour le deuxième test d'un groupe de trois. La valeur 1 est attribuée à une réponse positive notée pour le troisième test d'un groupe de trois. L'addition des valeurs pour chacun des groupes permet d'obtenir un profil numérique à huit chiffres.