J.P. Euzéby : Dictionnaire de Bactériologie Vétérinaire |
Créé le 19 août 1999
Galerie "BBL CRYSTAL® IDENTIFICATION SYSTEMS GRAM-POSITIVE ID KIT"
L'identification biochimique des bactéries peut avoir recours à des techniques conventionnelles ou à des techniques miniaturisées faisant appel à des galeries prêtes à l'emploi. Parmi ces dernières, les galeries API® (bioMérieux, F-69280 Marcy-l'Etoile) sont certainement les plus utilisées en France.
Dans plusieurs articles décrivant de nouvelles espèces de bactéries à Gram positif, les auteurs utilisent, outre des galeries API, des galeries "BBL CRYSTAL® Gram-Positive Identification Kit" (Becton Dickinson). Le système BBL CRYSTAL est moins bien connu des bactériologistes français que le système API et il nous a semblé utile de donner quelques renseignements à son sujet.
Une documentation complète peut être obtenue à l'adresse suivante : Becton Dickinson France S.A., Division Diagnostic, 11. rue Aristide Berges, F-3880 Pont de Claix.
Le dispositif "BBL CRYSTAL Gram-Positive Identification Kit" est constitué de 29 substrats déshydratés permettant la recherche d'enzymes ou l'acidification de sucres. Les activités enzymatiques sont recherchées vis-à-vis de substrats chromogènes ou de substrats "fluorescigènes". Ces derniers contiennent des dérivés coumariniques de la 4-méthylumbelliférone (4MU) ou de la 7-amino-4-méthylcoumarine (7-AMC). L'hydrolyse des substrats "fluorescigènes" a pour conséquence une augmentation de fluorescence détectée par observation sous une source de lumière ultraviolette.
De manière comparable au système API, les réactions obtenues sont codées pour obtenir un profil numérique qui doit être saisi sur un ordinateur afin d'être comparé à la base de données ("BBL CRYSTAL ID System Electronic Codebook") fournie par le fabriquant
Les substrats utilisés, le principe des réactions et l'interprétation des résultats figurent sur le tableau ci-dessous.
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Substrats |
Principe |
Résultats positifs |
Résultats négatifs |
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Contrôle destiné à apprécier la fluorescence libérée par les substrats "fluorescigènes". |
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4MU-b -D-glucoside L-valine-AMC L-phénylalanine-AMC 4MU-a -D-glucoside L-acide pyroglutamique-AMC L-tryptophane-AMC L-arginine-AMC 4MU-N-acétyl-b -D-glucosaminide 4MU-phosphate 4MU-b -D-glucuronide L-isoleucine-AMC |
Hydrolyse enzymatique d'une liaison amide ou glucidique conduisant à la libération d'un dérivé coumarinique fluorescent. |
Fluorescence bleue d'une intensité supérieure à celle du contrôle. |
Fluorescence bleue d'une intensité inférieure ou égale à celle du contrôle. |
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Tréhalose Lactose Méthyl-a & b -glucoside Saccharose Mannitol Maltotriose Arabinose Glycérol Fructose |
Acidification provoquant une diminution du pH (indicateur de pH : rouge de phénol). |
Jaune |
Orange/Rouge |
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p-nitrophényl-b -D-glucoside p-nitrophényl-b -D-cellobioside |
Hydrolyse enzymatique conduisant à la libération de p-nitrophénol. |
Jaune |
Incolore |
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Proline & Leucine-p-nitroanilide |
Hydrolyse enzymatique conduisant à la libération de p-nitroaniline. |
Jaune |
Incolore |
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p-nitrophényl-phosphate p-nitrophényl-a -D-maltoside o-nitrophényl-b -D-galactoside (ONPG) & p-nitrophényl-a -D-galactoside |
Hydrolyse enzymatique conduisant à la libération de p-nitrophénol. |
Jaune |
Incolore |
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Urée |
Hydrolyse de l'urée provoquant une augmentation du pH (indicateur de pH : bleu de bromothymol). |
Bleue |
Jaune/Vert |
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Esculine |
Hydrolyse de l'esculine conduisant à la formation d'un précipité noir d'ions ferriques. |
Brun/Noir |
Incolore/Gris clair |
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Arginine |
Utilisation de l'arginine provoquant une augmentation de pH (indicateur de pH : bleu de bromothymol). |
Pourpre |
Jaune/Gris |
Sites Internet :
Becton Dickinson Microbiology Systems
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