J.P. Euzéby : Dictionnaire de Bactériologie Vétérinaire |
Dernière mise à jour le 21 mai 2001
CORYNEBACTERIUM CAMPOREALENSIS, CORYNEBACTERIUM MASTITIDIS
Depuis 1982, le genre Corynebacterium connaît de nombreux remaniements. Sur les 30 espèces citées dans les "Approved Lists of Bacterial Names", 13 ont été transférées dans d’autres genres et, surtout, de nouvelles espèces sont régulièrement décrites.
En 1997 et en 1998, Fernandez-Garayzabal et al. ont proposé les nomenclatures de Corynebacterium mastitidis et de Corynebacterium camporealensis pour des souches de bactéries corynéformes isolées en culture pure (1 à 4 X 103 UFC/mL) du lait de brebis atteintes de mammites subcliniques. Tous ces isolements ont été réalisés en Espagne, sur du lait d'apparence normale, provenant d'animaux cliniquement sains mais présentant un CMT (California Mastitis Test) positif. Quelques études avaient déjà fait état de l’isolement de corynébactéries dans le lait de brebis atteintes de mammites subcliniques mais ces bactéries avaient été peu étudiées et non identifiées.
L'appartenance de ces bactéries au genre Corynebacterium repose sur la morphologie, les caractères biochimiques, les tests de chimiotaxonomie (présence d’acide meso-di-aminopimélique dans la paroi, présence d’acides mycoliques à courtes chaînes) et sur l'analyse de la séquence des gènes codant pour les ARNr 16S.
L'individualisation de ces deux espèces au sein du genre Corynebacterium est établie par la comparaison des séquences des gènes codant pour l'ARNr 16S.
. La séquence de l' ARNr 16S de Corynebacterium mastitidis diffère d'environ 5 p. cent des séquences des ARNr 16S des souches types de Corynebacterium renale ou de ¤ Corynebacterium caspium (espèces phylogéniquement les plus proches de Corynebacterium mastitidis).
. La séquence de l' ARNr 16S de Corynebacterium camporealensis diffère d'environ 5 p. cent des séquences des ARNr 16S des souches types de Corynebacterium striatum ou de Corynebacterium flavescens (espèces phylogéniquement les plus proches de Corynebacterium camporealensis).
1) Corynebacterium mastitidis
L’espèce Corynebacterium mastitidis (étude réalisée sur 14 souches) rassemble de courts bacilles à Gram positif, immobiles, non sporulés, se présentant de manière isolée ou groupés en palissades ou en V, aérobies, lipophiles (croissance stimulée par 1 p. cent de Tween 80 en gélose cœur-cervelle) et présentant un test de CAMP* négatif.
. Un caractère positif est obtenu pour les tests catalase, Tween 80 estérase, pyrazinamidase, phosphatase alcaline, phosphatase acide, estérase (C4), estérase lipase (C8), lipase (C14), leucine arylamidase, valine arylamidase, cystine arylamidase.
. Une réponse négative est notée pour les tests oxydase, réduction des nitrates, hydrolyse de l’esculine et de la gélatine, pyrrolidonyl-arylamidase, bêta glucuronidase, alpha galactosidase, bêta galactosidase, alpha glucosidase, alpha mannosidase, alpha fucosidase, N-acétyl-bêta-glucosaminidase, trypsine, chymotrypsine, acidification du glucose, du ribose, du xylose, du mannitol, du lactose, du maltose, du saccharose et du glycogène.
. La réponse au test uréase est variable selon les souches (7 souches sur 14 hydrolysent l’urée).
. En plaque API CORYNE, les codes obtenus sont 2100004 (8 souches) ou 2101004 (6 souches dont la souche type).
La croissance est lente sur une gélose au sang de mouton. Après 3 jours d'incubation à 37 °C et en aérobiose, les colonies sont légèrement convexes, rugueuses, blanchâtres, non hémolytiques et leur diamètre est inférieur à 1 mm. La croissance n’est pas obtenue sur une gélose contenant 6,5 % de NaCl.
En plaque API CORYNE, Corynebacterium mastitidis présente des caractères biochimiques voisins de Corynebacterium afermentans subsp. lipophilum ou de ¤ Corynebacterium urealyticum. Toutefois, cette espèce se différencie facilement de Corynebacterium afermentans subsp. lipophilum par son incapacité à croître en présence de 6,5 p. cent de NaCl et de Corynebacterium urealyticum par sa sensibilité aux antibiotiques (les 14 souches de Corynebacterium mastitidis sont sensibles à la pénicilline G, à l'ampicilline, à l'association amoxicilline-acide clavulanique, à la céfalotine, à la gentamicine et à l'acide nalidixique alors que Corynebacterium urealyticum résiste à ces antibiotiques).
Les caractères permettant de distinguer Corynebacterium mastitidis de quelques espèces lipophiles du genre Corynebacterium sont présentés dans le tableau I, les caractères permettant de différencier les corynébactéries associées à des mammites chez les ruminants figurent dans le tableau II et quelques caractères permettant de différencier Corynebacterium mastitidis des espèces phylogénétiquement apparentées sont donnés dans le tableau III.
2) Corynebacterium camporealensis
Corynebacterium camporealensis (étude réalisée sur 4 souches) est un court bacille à Gram positif, immobile, non sporulé, se présentant de manière isolée ou groupé en palissades ou en V, aéro-anaérobie, non lipophile (croissance non stimulée par 1 p. cent de Tween 80 en gélose cœur-cervelle) et présentant un test de CAMP légèrement positif en 24 heures et franchement positif après 48 à 72 d'heures d'incubation.
. Un caractère positif est obtenu pour les tests catalase, phosphatase alcaline, pyrazinamidase, estérase (C4), estérase lipase (C8), lipase (C14), leucine arylamidase, valine arylamidase (résultat faiblement positif), cystine arylamidase (résultat faiblement positif), acidification du glucose (en galerie API CORYNE, l'acidification est faible mais franchement positive dans un bouillon au rouge de phénol (Difco) contenant 1 p. cent de sucre et incubé 48 heures à 37 °C).
. Un caractère négatif est noté pour les tests oxydase, réduction des nitrates, uréase, hydrolyse de l'esculine et de la gélatine, phosphatase acide, pyrrolidonyl-arylamidase, bêta-glucuronidase, alpha-galactosidase, bêta-galactosidase, alpha-glucosidase, bêta-glucosidase, alpha-mannosidase, alpha-fucosidase, N-acétyl-bêta-glucosaminidase, trypsine et chymotrypsine, acidification glycogène, du lactose, du maltose, du mannitol, du ribose, du saccharose et du xylose.
. En plaque API CORYNE, les codes obtenus sont 2100104 ou 2100004 (lorsque l'acidification du glucose est très faible et considérée comme négative).
Après 48 heures d'incubation à 37 °C et en aérobiose sur une gélose Columbia au sang, les colonies sont rondes, légèrement convexes, lisses, d'une consistance crémeuse, non hémolytiques et leur diamètre atteint 1 à 2 mm. En anaérobiose, la croissance est plus faible et, en aérobiose ou en anaérobiose, le germe ne cultive pas en présence de 6,5 p. cent de NaCl.
En plaque API CORYNE, Corynebacterium camporealensis présente des caractères biochimiques voisins de Corynebacterium jeikeium (toutefois, Corynebacterium jeikeium est lipophile, ne pousse pas en anaérobiose et présente un test de CAMP négatif) ou de Corynebacterium afermentans subsp. afermentans ou de Turicella otitidis (mais ces deux dernières espèces donnent un résultat positif au test phosphatase acide et cultivent en présence de 6,5 p. cent de NaCl).
Les caractères permettant de distinguer Corynebacterium camporealensis de quelques espèces non lipophiles du genre Corynebacterium sont présentés dans le tableau IV et les caractères permettant de différencier les corynébactéries associées à des mammites chez les ruminants figurent dans le tableau II.
Orientation bibliographique
DE LA CRUZ (M.), SERRANO (E.), MONTORO (V.), MARCO (J.), ROMEO (M.), BASELGA (R.), ALBIZU (I.) et AMORENA (B.) : Etiology and prevalence of subclinical mastitis in the Manchega sheep at mid-late lactation. Small Rum. Res., 1994, 14, 175-180.
FERNANDEZ-GARAYZABAL (J.F.), COLLINS (M.D.), HUTSON (R.A.), FERNANDEZ (E.), MONASTERIO (R.), MARCO (J.), and DOMINGUEZ (L.): Corynebacterium mastitidis sp. nov., isolated from milk of sheep with subclinical mastitis. Int. J. Syst. Bacteriol., 1997, 47, 1082-1085
FERNÁNDEZ-GARAYZÁBAL (J.F.), COLLINS (M.D.), HUTSON (R.A.), GONZALEZ (I.), FERNÁNDEZ (E.), and DOMíNGUEZ (L.): Corynebacterium camporealensis sp. nov., associated with subclinical mastitis in sheep. Int. J. Syst. Bacteriol., 1998, 48, 463-468.
STEFANAKIS (A.), BOSCOS (C.), ALEXOPOULOUS (C.) et SAMARTZI (F.) : Frequency of subclinical mastitis and observations on somatic cell counts in ewes’ milk in northern Greece. Anim. Science, 1995, 61, 69-76.
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Test de CAMP (Christie, Atkins, Munch-Petersen)
La réalisation du test de CAMP est simple : sur une gélose au sang de mouton on ensemence en strie une souche de Staphylococcus aureus subsp. aureus bêta hémolytique puis la souche à étudier est ensemencée selon une strie perpendiculaire réalisée sans toucher celle de S. aureus subsp. aureus.
. Un CAMP test positif se traduit par une augmentation de la zone d'hémolyse à la jonction des deux stries.
. Un CAMP test est négatif lorsque l'hémolyse de la souche de Staphylococcus aureus subsp. aureus est inchangée.
. Un CAMP test est qualifié de "reverse positif" si on observe une inhibition de la zone d’hémolyse à la jonction des deux stries.