CHRYSEOBACTERIUM PISCICOLA

Note : Pour une information concernant les poissons cités dans ce fichier, voir le site FishBase (rentrer le nom du genre et le nom de l'espèce dans le fichier Search FishBase).

Des examens bactériologiques, pratiqués sur des poissons élevés au Chili et présentant des signes évoquant une infection à ¤ Flavobacterium psychrophilum, ont permis d'isoler huit souches bactériennes. Trois souches ont pour origine des alevins de saumons de l'Atlantique (Salmo salar) et cinq souches proviennent d'alevins de truites arc-en-ciel (Oncorhynchus mykiss). Les isolements ont été réalisées sur des géloses d’Anacker et Ordal* incubées à 15 °C durant trois jours.

L'analyse des séquences des ARNr 16S montre que les huit souches appartiennent au genre ¤ Chryseobacterium. Les espèces phylogénétiquement les plus proches sont Chryseobacterium soldanellicola (96, 9 p. cent de similitude) et Chryseobacterium soli (97,1 p, cent de similitude).
La séquence de la souche VQ-6316s (qui sera désignée comme la souche type de Chryseobacterium piscicola) présente 100 p. cent de similitude avec la séquence de la souche UOF CR2995 (isolée en 1995 d'une lésion ulcéreuse d'un saumon de l'Atlantique) et 100 p. cent de similitude avec la séquence de la souche UOF CR4395 (isolée en d'une lésion du pédoncule caudal d'un saumon de l'Atlantique) ; voir Bernardet et al. 2005.

Les hybridations ADN-ADN réalisées avec la souche VQ-6316s et les souches types de Chryseobacterium soldanellicola et de Chryseobacterium soli montrent que la souche VQ-6316s mérite d'être placée dans une nouvelle espèce (pourcentages d'homologie inférieurs 17,1).

Les caractères phénotypiques permettent de caractériser les huit souches isolées au Chili, ce qui conduit Ilardi et al. à proposer la nomenclature de Chryseobacterium piscicola (nomenclature validement publiée le 12 décembre 2009).

Les souches de Chryseobacterium piscicola se présentent comme des bacilles à Gram négatif, de 1,6 à 3,5 µm de longueur sur 0,8 à 1,2 µm de diamètre, immobiles, catalase et oxydase positives, à métabolisme non fermentatif.

. Une réponse positive est observée pour les tests hydrolyse de l'ADN (réaction faiblement positive), hydrolyse de l'esculine et hydrolyse de la gélatine.

. Une réponse négative est obtenue pour les tests réduction des nitrates, ADH, LDC, ODC, uréase, indole, production d'hydrogène sulfuré, RM, VP, hydrolyse de l'agar, hydrolyse de l'amidon, hydrolyse de la caséine, hydrolyse de la tyrosine et hydrolyse du Tween 80.

. Les huit souches donnent un profil numérique identique (0006024) sur des galeries API 20E incubées à 15 °C. Il convient de remarquer que les résultats obtenus pour l'acidification du glucose et du saccharose sont positifs alors que les résultats obtenus par des techniques traditionnelles en tubes sont négatifs.

. En utilisant des galeries API ZYM incubées à 15 °C, une réponse positive est obtenue pour les tests phosphatase alcaline, estérase, estérase lipase, lipase, leucine arylamidase, valine arylamidase, cystine arylamidase, alpha-chymotrypsine, phosphatase acide , naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, bêta-glucuronidase, alpha-glucosidase, bêta-glucosidase et N-acétyl-bêta-glucosaminidase.
Les tests trypsine, alpha-galactosidase, bêta-galactosidase, alpha-mannosidase et alpha-fucosidase donnent une réponse négative.

Une culture est observée pour des températures comprises entre 4 et 28 °C (température optimale de croissance égale à 15 °C) et pour des concentrations en NaCl comprises entre 0 et 3 p. cent (croissance optimale pour une concentration de 0,5 p. cent).
La bactérie cultive sur une gélose R2A** et sur une gélose trypticase soja, mais aucune croissance n'est observée après culture sur une gélose de MacConkey, sur une gélose Marine Agar 2216 ou sur une gélose au citrate de Simmons.
Les colonies sont circulaires, à contour régulier, brillantes, pigmentées en jaune et, sur une gélose Columbia au sang de mouton, elles s'entourent d'une zone d'hémolyse alpha.

Les caractères permettant de différencier Chryseobacterium piscicola d'autres espèces du genre sont donnés dans le tableau I.

Chryseobacterium piscicola est souvent isolé en association avec ¤ Flavobacterium psychrophilum. Les principaux caractères permettant de différencier ces deux espèces sont présentés dans le tableau ci-dessous.

	Chryseobacterium piscicola	Flavobacterium psychrophilum
Culture à 28 °C	+	-
Culture en présence de 3 p. cent de NaCl	+	-
Culture sur gélose trypticase soja	+	-
Culture sur gélose Columbia au sang de mouton	+	-
Hydrolyse de l'esculine	+	-

Les poissons infectés présentent des ulcères de la peau et des muscles, retrouvés principalement sur les flancs, la région anale et le pédoncule caudal. Cliniquement, l'infection est comparable à la maladie des eaux froides due à ¤ Flavobacterium psychrophilum.
Chryseobacterium piscicola peut être isolé en culture pure des lésions mais, le plus souvent, il est associé à ¤ Flavobacterium psychrophilum.

Expérimentalement, l'immersion de saumons de l'Atlantique (poids de 8 à 10 grammes) durant 18 heures, dans une eau à 15 °C contenant cinq millions bactéries par mL, ne conduit pas à l'apparition de signes cliniques. Il en va de même lorsque l'eau contient une souche de ¤ Flavobacterium psychrophilum. En revanche, l'immersion dans une eau contenant un mélange d'une souche de Chryseobacterium piscicola (2,5 x 10⁶ cellules par mL) et d'une souche de ¤ Flavobacterium psychrophilum (2,5 x 10⁶ cellules par mL), permet de reproduire la maladie et les germes peuvent être isolés des poissons malades. Une mortalité apparaît 11 jours après l'infection expérimentale et le taux de mortalité atteint 100 p. cent 23 jours après l'infection. Cliniquement, l'infection est identique à l'infection naturelle.

La sensibilité aux antibiotiques, mesurée après 48 ou 72 heures d'incubation sur une gélose de Müller-Hinton incubée à 15 °C, est identique pour les huit souches.

Une résistance est observée pour l'oxytétracycline (disques chargés à 30 µg). En revanche les souches sont sensibles à l'amoxicilline (disques chargés à 25 µg), au triméthoprime-sulfaméthoxazole (disques chargés à 1,25/23,75 µg), à l'enrofloxacins (disques chargés à 5 µg) et au florfénicol (disques chargés à 30 µg).

BERNARDET (J.F.), NAKAGAWA (Y.) et HOLMES (B.) : Proposed minimal standards for describing new taxa of the family Flavobacteriaceae and emended description of the family. Int. J. Syst. Evol. Microbiol., 2002, 52, 1049-1070.

BERNARDET (J.F.), VANCANNEYT (M.), MATTE-TAILLIEZ (O.), GRISEZ (L.), TAILLIEZ (P.), BIZET (C.), NOWAKOWSKI (M.), KEROUAULT (B.) et SWINGS (J.) : Polyphasic study of Chryseobacterium strains isolated from diseased aquatic animals. Sys. Appl. Microbiol., 2005, 28, 640-660.

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Tryptone : 0,5 p. cent
Extraits de levure 0,05 p. cent
Acétate de sodium 0,02 p. cent
Extrait de viande de bœuf 0,02 p. cent
Agar 1,5 p. cent
pH 7,2

J.P. Euzéby : Dictionnaire de Bactériologie Vétérinaire